Microbiologie technique
1 Dictionnaire des techniques
Jean-Noël Joffin
Guy Leyral
Collection Biologie technique
Comment rechercher un thème donné8
A
Acides nucléiques: (DNase, thermonucléase)11
Acides organiques: citrate, malonate, acétate12
1. Le citrate12
2. Le malonate14
3. L'acétate ou éthanoate14
Antibiotiques: (généralités)15
1. Définition15
2. Principaux antibiotiques et leur classification15
3. Le mode d'action des antibiotiques22
4. Résistance des microorganismes aux antibiotiques23
5. Éléments de thérapeutique et conséquences au laboratoire25
6. Fabrication des antibiotiques28
Antibiogramme: choix des antibiotiques en fonction du microorganisme testé30
Antibiogramme: méthode des disques32
1. Principe général32
2. Technique33
Antibiogramme: méthode en deux concentrations critiques (système type ATB)47
1. Principe47
2. Technique48
3. Extension du système ATB50
4. Automatisation de l'antibiogramme50
Antibiogramme: interprétation des résultats et intelligence artificielle52
1. Quelques éléments d'analyse simple54
2. Utilisation de l'intelligence artificielle54
3. Recommandations de la SFM57
Antibiogramme des champignons (antifongigramme)60
Antibiotiques: Bêta-lactamases60
1. Réactions catalysées. Propriétés60
2. Techniques de mise en évidence rapide61
3. Interprétation de l'antibiogramme et Bêta-lactamases des bacilles Gram négatif67
Antibiotiques: CMI (concentration minimale inhibitrice des antibiotiques)68
1. Bactériostase et bactéricidie - Définition de la CMI68
2. Détermination de la CMI par la méthode des dilutions68
Antibiotiques: pouvoir bactéricide des antibiotiques, de leurs associations, du sérum70
1. Étude du pouvoir bactéricide des antibiotiques et de leurs associations71
2. Étude du pouvoir bactéricide d'un sérum74
Antigènes microbiens: anticorps antimicrobiens75
1. Les différents antigènes75
2. La production d'anticorps antimicrobiens76
3. Les techniques de mise en évidence des antigènes microbiens76
4. Les anticorps, témoins du contact d'un organisme avec l'antigène77
Antigènes solubles ou exo-antigènes (recherche des)77
1. Recherche par électrosynérèse (= contre-immunoélectrophorèse ou électroimmunodiffusion)78
2. Recherche par les techniques au latex79
Antiseptiques et désinfectants (biocides)80
Arylamidases ou aminopeptidases82
Atmosphère de culture83
1. Les enceintes83
2. Les systèmes de génération gazeux84
3. Pour obtenir l'anaérobiose85
4. Pour obtenir une atmosphère microaérophile85
5. Pour obtenir une atmosphère à 10% de dioxyde de carbone85
6. Les sachets plastique en atmosphère contrôlée86
Auxanogramme du carbone et de l'azote87
1. Principe87
2. Milieu de base87
3. Techniques88
Azote minéral (réduction des nitrates et nitrites)89
1. Réduction des nitrates89
2. Réduction des nitrites92
Azote organique92
1. Les différentes formes de l'azote organique92
2. Métabolisme de l'azote organique93
3. L'azote dans les milieux de culture
94
B
Bactériocines95
Besoins nutritifs (exigences nutritives) et culture microbienne95
1. Base minérale95
2. Source d'énergie96
3. Source de carbone96
4. Facteurs de croissance96
5. Source d'azote97
6. Conditions de culture97
7. Conclusion
97
C
Camp-test99
Candida: tests particuliers d'identification morphologique (blastèse, chlamydospores)100
1. Recherche des chlamydospores100
2. Test de filamentation (blastèse)101
Catalase et peroxydases101
1. Principe101
2. Intérêt102
3. Techniques102
Chromatographie en phase gazeuse103
1. Principe et matériel103
2. Applications à l'identification microbienne104
Colonies (description des) examen macroscopique des cultures106
1. Conditions de l'examen des colonies106
2. Aspect des colonies106
3. Les trois types principaux de colonies107
Conservation des souches
108
D
Décarboxylases (LDC, ODC) et arginine-dihydrolase (ADH)109
1. Réactions catalysées109
2. Principe de ces recherches110
3. Techniques111
Dénombrement (numération)113
1. Techniques de numération en milieu solide114
2. Techniques par filtration116
3. Techniques spectrophotométriques117
4. Techniques potentiométriques117
5. Techniques microscopiques117
Désaminases (TDA, PDA, LDA)118
Discrimination (tests de) ou d'orientation120
1. Les caractères révélés sur le milieu d'isolement120
2. Un test de discrimination: l'uréase rapide
121
E
Enrichissement123
Enzymes124
Épidémiologie126
Escherichia coli entéropathogènes chez les nourrissons (EPEC): sérogroupage126
Esculine (hydrolyse de l') ou esculinase (Bêta-glucosidase)128
Estérases
129
F
Facteurs de croissance131
1. Généralités131
2. Le cas des Haemophilus132
3. Stenotrophomonas maltophilia134
Fluorescence134
1. La fluorescence dans les milieux134
2. La fluorescence en microscopie
135
G
Gamma-glutamyl-transférase (gamma-GT)137
Gaz (production de)138
Glucides (utilisation des)138
1. Détermination de la voie d'attaque des glucides139
2. Techniques de mise en évidence de l'utilisation d'un glucide par acidification139
3. Techniques de mise en évidence de l'utilisation d'un glucide par disparition du substrat143
4. Technique de mise en évidence de l'utilisation d'un glucide par auxanogramme du carbone144
5. Quelques formules de glucides importants144
Glycosidases
148
H
Hippurate (hydrolyse de l')149
Hygiène des surfaces (contrôle) ou prélèvements de surface150
1. Intérêt des contrôles de propreté microbiologique des surfaces150
2. Techniques de prélèvements de surface150
3. Interprétation des résultats
151
I
Immunoenzymologie153
Indicateurs154
1. Les indicateurs de pH154
2. Les indicateurs redox155
3. Les indicateurs de sulfures155
4. Autres indicateurs156
Inhibiteurs utilisés pour l'identification des microorganismes156
Inhibiteurs utilisés pour l'isolement159
Isolement - Isolement sélectif161
1. Technique de l'isolement161
2. Milieux d'isolement162
3. Isolement non sélectif163
4. Isolement sélectif de bactéries à Gram négatif164
5. Isolement sélectif de bactéries à Gram positif171
6. Isolement sélectif des champignons
176
K
Kligler-Hajna (glucose-lactose-H2S)177
1. Composition177
2. Ensemencement177
3. Principe177
4. Lecture
178
L
L-alanine aminopeptidase: une alternative à la coloration de Gram181
1. Intérêt de la recherche181
2. Principe du test181
3. Technique181
Lipides (lipase, tributyrine-hydrolase, lécithinase)182
1. L'activité lipasique182
2. L'activité estérasique184
3. L'activité «lécithinasique» (phosphatidyl-choline-estérases)184
Lysine-fer186
1. Le glucose186
2. La présence de lysine permet de détecter la LDC et la LDA186
3. La production d'H2S à partir du thiosulfate187
Lysotypes
187
M
Mannitol-mobilité-nitrates189
1. Fermentation du mannitol189
2. La mobilité189
3. Réduction des nitrates et production de gaz189
Métabolisme énergétique190
1. Les grandes voies du métabolisme énergétique des bactéries chimio-organotrophes usuelles191
2. Intégration du métabolisme énergétique dans le métabolisme195
3. Grands principes des méthodes d'étude198
Microméthodes: galeries miniaturisées199
1. De la galerie traditionnelle à la galerie miniaturisée: l'évolution des techniques de l'identification microbienne199
2. Quelques exemples de galeries miniaturisées disponibles en France200
3. Galeries miniaturisées et automatisation201
Milieux de culture et leur préparation202
1. Définition. Milieux synthétiques et milieux empiriques202
2. Milieux synthétiques203
3. Milieux empiriques203
4. Préparation des milieux de culture205
Milieux enrichis207
1. Milieux enrichis au sang207
2. Milieux enrichis avec divers liquides biologiques210
Milieux (composition des)211
N
Niacin test
251
O
ONPG hydrolase (test ONPG, Bêta-galactosidase, métabolisme du lactose)253
1. Intérêt de la recherche253
2. Principe254
3. Technique255
Oxydase255
P
Peptones259
1. Généralités259
2. Les principales peptones, caractéristiques, et utilisations260
Phosphatases262
Pigments263
1. Pigments diffusibles263
2. Pigments non diffusibles264
Polyosides extracellulaires ou exopolyosides (production de)265
Pouvoir pathogène expérimental266
Protéases266
1. Libération de particules enfermées dans la gélatine266
2. Précipitation de la gélatine non hydrolysée267
3. Autres techniques267
Pseudomonas aeruginosa: sérogroupage269
Puces DNA269
1. Principe des puces DNA269
2. Applications possibles
270
Q
Qualité au laboratoire et GBEA271
1. La démarche qualité271
2. Les documents qualité et leur gestion273
3. Reconnaissance de la démarche qualité275
4. Quelques éléments du GBEA
278
R
Réactifs usuels et colorants fiches de préparation285
1. Produits chimiques et sécurité285
2. Fiches de préparation des principaux réactifs et colorants289
RM (Test du)
293
S
Salmonella: sérogroupage et sérotypage295
1. Le sérogroupage et le sérotypage des Salmonella295
2. Technique du sérogroupage296
Sécurité au laboratoire de microbiologie300
1. Prévention des risques chimiques au laboratoire de microbiologie300
2. Sécurité atmosphérique300
3. Prévention des risques microbiologiques300
Sérogroupage et sérotypage: l'identification immunologique318
1. Réactions mettant directement en jeu des bactéries entières318
2. Réaction de précipitation en tube effilé318
3. Réaction d'immunofluorescence indirecte318
4. Sérogroupage par test de gonflement capsulaire319
Sérologie microbienne319
Sérum de boeuf coagulé (SBC)320
Shigella: sérogroupage320
Sondes nucléiques et amplification génique321
1. Amplification génique par PCR321
2. Sondes321
Soufre324
1. Production d'hydrogène sulfuré324
2. Tétrathionate-réductase (TTR)325
Staphylococcus aureus: coagulase (libre)325
Staphylococcus aureus: tests de coagglutination326
Stérilisation328
Streptococcus, Enterococcus, Lactococcus: galerie de Sherman329
Streptococcus, Enterococcus, Lactococcus: groupage antigénique330
1. Les antigènes des streptocoques330
2. Méthodologie du groupage par extraction puis immunoprécipitation331
3. Méthodologie du groupage par immunoagglutination332
Streptococcus pneumoniae: lyse par la bile (test de)333
Streptococcus pneumoniae: test au latex, typage
334
T
Taxonomie335
1. Les grands ensembles335
2. Comment classer?335
3. Comment utiliser les critères pour classer?338
4. Les bases de données. Comment identifier?339
5. Logiciels d'identification automatisée341
Toxinotypie344
1. Exemple du botulisme344
2. L'exemple de la diphtérie344
3. Exemple des entérotoxines staphylococciques344
4. Technique immunoenzymatique345
5. Technique utilisant des latex345
Tryptophanase345
Type respiratoire346
1. Rapport des bactéries avec l'oxygène (l'air)346
2. Technique
348
U
Uréase349
1. Principe général349
2. Les milieux et leurs indications350
3. Techniques350
Urée-tryptophane (ou Urée-indole)
351
V
Vibrio cholerae (sérogroupage)353
VP (Vosges-Proskauer)
353
Bibliographie
355
Index
361