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Culture de cellules animales : méthodologies, applications

Résumé

Le développement des bases générales et des méthodes communes d'obtention, de conservation et de contrôle des cultures de cellules animales et le détail des différentes techniques appliquées à chaque type de cellules. ©Electre 2014


  • Contributeur(s)
  • Éditeur(s)
  • Date
    • 2014
  • Langues
    • Français
  • Description matérielle
    • 1 vol. (667 p.) : illustrations en noir et en couleur ; 26 x 30 cm
  • Collections
  • Sujet(s)
  • ISBN
    • 978-2-7430-1989-1
  • Indice
    • 576.6 Biologie cellulaire, cytologie et histologie générales
  • Quatrième de couverture
    • Nouvelle édition entièrement réactualisée

      Le Livre

      La 3e édition de ce livre de référence a bénéficié d'une refonte complète et d'une augmentation substantielle pour tenir compte des avancées accumulées pendant les onze années écoulées depuis la précédente édition.

      Après un premier chapitre retraçant l'historique de la culture cellulaire de 1907 à nos jours, l'ouvrage se divise en cinq grandes parties :

      • la biologie et l'environnement des cellules en culture, rappel des données essentielles de biologie cellulaire
      • les techniques et méthodes, indispensables à connaître et maîtriser
      • la pharmacotoxicologie in vitro, ou comment la survie ou la fonction d'une cellule peut être préservée ou mise en danger
      • les systèmes intégrés et cultures spécialisées : partie centrale de l'ouvrage consacrée aux modèles cellulaires provenant des différents systèmes ou organes et à leurs progrès impressionnants, leurs applications majeures et les indispensables protocoles qui s'y rattachent
      • les autres modèles issus de bivalves marins, de poissons ou d'arthropodes.

      Enfin, le dernier chapitre se penche sur les questions éthiques, sociales et juridiques qui encadrent et délimitent l'utilisation des cellules et tissus d'origine humaine et les techniques et progrès scientifiques associés.

      Enseignants, chercheurs, étudiants en sciences biologiques, techniciens et ingénieurs.

      Il intéressera également tout organisme formateur dans ce domaine en constante progression, en particulier pour se conformer aux directives européennes REACH.


  • Tables des matières
      • Culture de cellules animales

      • Georgia Barlovatz-Meimon, Xavier Ronot

      • Lavoisier

      • Tec et Doc

      • Liste des collaborateursV
      • Préface M. AdolpheXXV
      • Avant-propos G. Barlovatz-Meimon, X. RonotXXVII
      • Liste des abréviationsXXIX
      • Chapitre 1. Origine de la culture de cellules I. Freshney1
      • Partie I
        Biologie et environnement des cellules en culture
      • Chapitre 2. Adhésion cellulaire A. Pierres, P. Bongrand13
      • Introduction13
      • Les interactions adhésives régulent la quasi-totalité des fonctions cellulaires13
      • Le comportement des cellules adhérentes dépend très significativement des propriétés physiques du substrat14
      • L'adhésion cellulaire repose essentiellement sur de très nombreux récepteurs membranaires spécialisés15
      • Méthodes d'étude de l'adhésion cellulaire : aspects généraux17
      • Propriétés mécaniques et/ou cinétiques de l'adhésion17
      • Étude morphologique de l'adhésion cellulaire20
      • Régulation de l'adhésion cellulaire24
      • Régulation de la répulsion stérique24
      • Régulation de l'expression des récepteurs d'adhésion24
      • Régulation fonctionnelle des récepteurs d'adhésion : modifications conformationnelles24
      • Microagrégation (clustering)24
      • Localisation des récepteurs sur les extrémités des protrusions membranaires25
      • Modification de l'interaction des récepteurs d'adhésion avec le cytosquelette d'actine25
      • Contrôle du détachement des cellules adhérentes25
      • Modifications conformationnelles25
      • Rupture mécanique des liaisons26
      • Diminution de la rigidité membranaire26
      • Protéolyse de molécules impliquées dans l'adhésion26
      • Insertion d'éléments répulsifs dans la zone d'adhésion26
      • Comment l'adhésion à un substrat peut-elle modifier le comportement cellulaire ?26
      • Signaux engendrés par l'occupation des récepteurs d'adhésion26
      • Regroupement de quelques molécules susceptibles d'interagir pour produire un signal27
      • Génération de forces et mécanotransduction à l'interface cellule-substrat27
      • Contrôle de l'organisation du cytosquelette28
      • Importance de l'étalement : effet de la forme sur le comportement cellulaire28
      • Conclusion29
      • Chapitre 3. Variabilité non génétique dans les cultures cellulaires G. Gorre, D. Stockholm, A. Paldi33
      • Historique33
      • Cellule unique et population cellulaire34
      • Fluctuations d'origine interne35
      • Bruit moléculaire : la loi des petits nombres35
      • Bruit structural : compartimentation subcellulaire et dynamique chromatinienne36
      • Stochasticité expression génique37
      • Fluctuations d'origine externe40
      • Milieu nutritif et métabolisme cellulaire40
      • Organisation spatiale des cellulaires in vitro40
      • Variations liées aux manipulations expérimentales41
      • Maîtriser les fluctuations42
      • Conclusion42
      • Chapitre 4. Aspects physiques des comportements collectifs épithéliaux O. Cochet-Escartin, P. Silberzan45
      • Structure et régulation du tissu épithélial45
      • Mouvements collectifs de tissus in vivo47
      • Étude de mouvements collectifs de tissus in vitro48
      • Techniques expérimentales48
      • Particularités du mouvement collectif50
      • Polarisation du mouvement collectif54
      • Études théoriques de la migration collective55
      • Modèles continus55
      • Modèles discrets55
      • Conclusion58
      • Chapitre 5. Défis de la culture de cellules animales en bioréacteur A. Marc, E. Guedon, E. Olmos, F. Blanchard, I. Chevalot61
      • Principaux réacteurs en mode agité61
      • Différents modes d'alimentation du milieu de culture61
      • Systèmes de culture placés en incubateur62
      • Bioréacteurs contrôlés62
      • Influence de l'environnement cellulaire63
      • Du milieu avec sérum jusqu'au milieu chimiquement défini63
      • Méthodes de criblage de la formulation du milieu de culture64
      • Éléments nutritifs solubles64
      • Gaz dissous65
      • Paramètres physicochimiques65
      • Culture des cellules sur microporteurs65
      • Différents types de supports65
      • Principaux paramètres opératoires65
      • Expansion cellulaire en système de culture agité67
      • Analyses et régulations en ligne sur le bioréacteur67
      • Mesure et régulation de la température67
      • Mesure et régulation de la concentration en oxygène dissous67
      • Mesure et régulation de la concentration en dioxyde de carbone dissous68
      • Mesure et régulation du pH69
      • Nouveaux outils d'analyse en ligne69
      • Analyse des cellules69
      • Analyse des composés solubles69
      • Chapitre 6. Sphéroïdes O. Oudar71
      • Définition, historique, intérêts, avantages71
      • Obtention, caractérisation des sphéroïdes72
      • Protocoles75
      • Formation des sphéroïdes75
      • Transfert et culture cellulaire75
      • Conclusion76
      • Chapitre 7. Dynamique du microenvironnement cellulaire A. Supiramanian, A. Cartier-Michaud, C. Charrière-Bertrand, M. Malo, G. Barlovatz-Meimon77
      • De la matrice extracellulaire au microenvironnement77
      • Le microenvironnement évolue avec le dialogue cellules/matrice78
      • Le « matrisome » humain79
      • La matrice extracellulaire, une combinatoire aux rôles pléiotropiques83
      • Un acteur exemplaire du dialogue cellule / matrice, la fibronectine83
      • La dynamique du microenvironnement constitue un système complexe86
      • Une dynamique particulière : le microenvironnement tumoral87
      • Exploration de toutes ses facettes87
      • Les nouveaux venus du microenvironnement : exosomes, microvésicules et autres « débris cellulaires »94
      • L'exemple de PAI-1, frein ou promoteur de la migration cellulaire et acteur direct de la transition mésenchymo-amaeboïde (MAT)96
      • Conclusion102
      • Annexes110
      • Chapitre 8. Bonnes pratiques de culture cellulaire S. Curtet-Benitski, A.-L. Filiputti-Gilquin118
      • Matières premières118
      • Cellules119
      • Milieux, additifs et réactifs120
      • Consommables121
      • Matériels121
      • Postes de sécurité microbiologique121
      • Incubateurs à CO2122
      • Centrifugeuses123
      • Autres équipements123
      • Main-d'oeuvre123
      • Formation du personnel123
      • Hygiène et sécurité124
      • Milieu : le laboratoire de culture cellulaire124
      • Niveaux de sécurité biologique et organisation124
      • Désinfection des locaux124
      • Évacuation des déchets124
      • Méthodes125
      • Conclusion126
      • Annexe127
      • Chapitre 9. Cryopréservation des cellules X. Ronot, M. Kadri, V. Martel-Frachet128
      • Aspects physicochimiques de la formation des cristaux128
      • Effets biophysiques de la formation de glace129
      • Déshydratation cellulaire129
      • Stress mécanique129
      • Cristallisation intracellulaire129
      • Choc thermique129
      • Effets biologiques de la formation de glace129
      • Agents cryoprotecteurs131
      • Conditions de congélation132
      • Matériel cellulaire132
      • Identification des cryotubes pour l'archivage132
      • Dispositifs de congélation132
      • Cryoconservateurs132
      • Congélation à-80°C133
      • Décongélation133
      • Hygiène et sécurité134
      • Congélation sans sérum134
      • Conservation de courte durée134
      • Transport des cellules134
      • Conclusion135
      • Annexe136
      • Partie II
        Techniques et méthodes
      • Chapitre 10. Viabilité, cytotoxicité, génotoxicité A. Baeza-Squiban, K. Andréau139
      • Méthodes d'étude de la viabilité cellulaire140
      • Approches morphologiques140
      • Méthodes de quantification de la viabilité cellulaire140
      • Quantification des cellules mortes par la perte d'intégrité de la membrane plasmique143
      • Méthodes utilisant l'exclusion de colorants vitaux143
      • Méthodes utilisant la libération d'enzymes intracellulaires143
      • Détection couplée des cellules mortes et des cellules vivantes144
      • Cytotoxicité : étude spécifique des différentes voies de mort cellulaire144
      • Classification des différents types de mort cellulaire144
      • Détection et mesure spécifique de l'apoptose144
      • Détection et mesure spécifique de la nécrose régulée149
      • Détection et mesure spécifique de l'autophagie149
      • Méthodes d'étude de la prolifération cellulaire149
      • Dénombrement des cellules149
      • Quantification des acides nucléiques149
      • Incorporation d'un précurseur de l'ADN150
      • Mesure de l'impédance électrique cellulaire150
      • Étude du cycle cellulaire150
      • Méthodes d'étude de la génotoxicité : le test des comètes150
      • Conclusion151
      • Chapitre 11. Apport de la cytométrie en flux à la culture cellulaire J.-F. Mayol153
      • Principe de la cytométrie en flux153
      • Réseau fluidique153
      • Système optique153
      • Interface informatique155
      • Différents types de marquages155
      • Anticorps155
      • Sondes156
      • Transfection156
      • Compensations de fluorescence157
      • Interprétation des résultats157
      • Régions et conditionnement des graphes157
      • Pourcentages157
      • Valeurs absolues157
      • Intensités de fluorescence158
      • Applications159
      • Caractérisation phénotypique de sous-populations présentes159
      • Mesure d'une intensité de fluorescence159
      • Étude de la viabilité, de la mort cellulaire159
      • Cycle cellulaire et prolifération161
      • Fonctions cellulaires163
      • Cellules souches164
      • Biologie végétale164
      • Microbiologie, virologie165
      • Tri cellulaire165
      • Nouveaux développements165
      • Chapitre 12. Imagerie cellulaire J-P. Kleman, D. Grunwald168
      • Préservation du vivant168
      • Conditions de culture et maintien de l'homéostasie168
      • Maintien de la température169
      • Milieux de culture spécifiques, maintien du pH169
      • Stress radiatifs, stress oxydatifs170
      • Microscopes pour l'observation des cellules vivantes170
      • Principes généraux de la microscopie170
      • Microscopie optique172
      • Microscopie de fluorescence174
      • Dépasser les limites techniques de la résolution optique185
      • Chapitre 13. Transfert de gènes dans les cellules en culture P. Loyer188
      • Définitions et historique du transfert de gènes188
      • Transfert horizontal de gènes : le modèle bactérien190
      • Captation d'ADN par les cellules d'eucaryotes en culture190
      • Transfection d'ADN par des molécules polyanioniques : lipofection et polyfection191
      • Transfection par procédés physiques191
      • Transfert de gènes par infection virale : la transduction192
      • Plasmides et génomes viraux modifiés pour le transfert de gènes193
      • Transfection, transduction, oligonucléotides antisens et ARN interférence195
      • Applications du transfert d'acides nucléiques dans les cellules en culture195
      • Études de la fonction des gènes et des protéines196
      • Établissement de lignées cellulaires recombinantes202
      • Thérapie génique ex vivo205
      • Choix méthodologique du transfert de gènes : quels outils pour quelles applications ?205
      • Études de séquences régulatrices de la transcription et de la maturation des ARN206
      • Localisation subcellulaires de protéines et identification de leurs partenaires206
      • Impact de la surexpression accrue et de l'extinction de gènes sur les cellules en culture207
      • Établissement de lignées cellulaires recombinantes208
      • Chapitre 14. Méthodes informatiques en biologie G. Barlovatz-Meimon, S. Sené217
      • Vision globale de la bio-informatique actuelle218
      • Bio-informatique des séquences218
      • Bio-informatique des structures220
      • Bio-informatique des réseaux221
      • Traitement de l'information223
      • Une application traditionnelle  : la phylogénie224
      • Réseaux et modélisation225
      • Modélisation théorique : le cas des réseaux d'automates226
      • Modélisation appliquée230
      • Conclusion232
      • Annexes235
      • Partie III
        pharmacotoxicologie in vitro
      • Chapitre 15. Voies de signalisation majeures impliquées dans la survie et la prolifération cellulaire M. Guyot, G. Pagès241
      • Généralités sur le fonctionnement du couple ligands/récepteurs241
      • Différents modes de transmission du signal243
      • Récepteurs membranaires majeurs244
      • Récepteurs à activé tyrosine kinase244
      • Récepteurs couplés aux protéines G244
      • Récepteurs des cytokines couplés à la kinase JAK245
      • Récepteurs du Transforming Growth Factor bêta (TGFbêta)246
      • Voies de signalisation principales247
      • Voie de l'AMP cyclique (AMPc)247
      • Voie de la phospholipase C (PLC)247
      • Voie de la phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)248
      • Voies des Mitogen Activated Protein Kinases (MAPK)248
      • Modifications pathologiques251
      • Convergence, divergence et interférence entre les différentes voies de signalisation252
      • Conclusion252
      • Chapitre 16. De la cible à la molécule S. Mourah, F. Calvo255
      • Angiogenèse tumorale255
      • Mécanisme de l'angiogenèse tumorale255
      • « Switch » angiogénique255
      • Processus de l'angiogenèse tumorale256
      • Les facteurs VEGF et leurs récepteurs (VEGFR)257
      • VEGF (VEGF-A)257
      • Récepteurs des VEGF258
      • Activités biologiques du système VEGF/VEGFR258
      • Les anti-angiogéniques258
      • Objectifs de la thérapie anti-VEGF259
      • Bevacizumab (Avastin®)259
      • Partie IV
        Systèmes intégrés et cultures spécialisées
      • Chapitre 17. Cellules souches263
      • Cellules souches et cellules souches embryonnaires B. Pain263
      • Totipotence et clonage263
      • Pluripotence et cellules souches embryonnaires264
      • Conclusion267
      • La niche des cellules souches : enjeux conceptuels et technologiques pour l'étude des mécanismes normaux et tumoraux V. Maguer-Satta, V. Rochet269
      • Concept et problématiques269
      • Exemple de modélisation de la niche osseuse en culture 3D au sein d'un biomatériau277
      • Conclusion générale et perspectives285
      • Chapitre 18. Ingénierie de la cornée : vers des modèles de plus en plus complexes C. Vigouroux, O. Damour, D. Aberdam, C. Auxenfans291
      • Modèles 3D291
      • Épithélium pluristratifié sans stroma291
      • Épithélium avec stroma (hémi-cornée)292
      • Cornée reconstruite complète293
      • Sources potentielles de cellules capables de se différencier en cellules épithéliales de cornée humaine294
      • Cellules souches embryonnaires humaines (hESC)294
      • Cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPS)294
      • Chapitre 19. La peau reconstruire : un outil d'étude de pharmacotoxicologie et de création d'un modèle in vitro M. Dos Santos, A. Thepot, O. Damour, C. Auxenfans297
      • De la peau humaine aux équivalents cutanés : motivations ayant suscité leur développement297
      • Modèles simples développés pour les tests d'innocuité298
      • Modèles tridimensionnels et tests d'efficacité299
      • Peaux reconstruites dans les matrices d'origine humaine ou animale299
      • Peaux reconstruites dans une matrice biologique d'origine biosynthétique300
      • Création de modèle in vitro : exemple du vieillissement302
      • Modifications chimiques du support302
      • Modifications biologiques303
      • Conclusion303
      • Chapitre 20. Culture de cellules nerveuses J. Brocard, S. Fraboulet305
      • Cultures primaires de cellules nerveuses305
      • Phylogénie des cellules nerveuses305
      • Neurones du système nerveux central307
      • Neurones granulaires du cervelet : un modèle de migration307
      • Autres cellules nerveuses en culture308
      • Lignées cellulaires308
      • Différenciation de cellules souches309
      • Cas des cellules humaines309
      • Modifications de cultures matures309
      • Substrats et supports311
      • Transfection/infection312
      • Protocoles313
      • Considérations générales313
      • Culture de ganglions spinaux de poulet314
      • Culture de neurones hippocampiques ou corticaux314
      • Culture de neurones granulaires de cervelet315
      • Co-cultures à partir de neurosphères316
      • Transfection au phosphate de calcium317
      • Chapitre 21. Muscle squelettique : structure, origine et techniques de culture cellulaire F. Edom-Vovard, D. Vallese, E. Negroni, V. Mouly319
      • Structure et origine du muscle squelettique319
      • Structure du muscle squelettique adulte : les fibres musculaires319
      • Origine du muscle squelettique320
      • Cellules satellites322
      • Technique de culture cellulaire325
      • Complexité de l'organe325
      • Pourquoi utiliser les cultures de cellules ?325
      • Cultures primaires326
      • Lignées et immortalisation327
      • Fibres isolées329
      • Culture en trois dimensions (3D)329
      • Chapitre 22. Cellules cardiaques F. Rochais333
      • Introduction333
      • Structure en fonction du coeur333
      • Développement du coeur334
      • Cellule cardiaque336
      • Cultures de cellules cardiaques337
      • Quelques rappels historiques338
      • Isolement et culture primaire de cellules cardiaques338
      • Lignée cellulaires établies342
      • Cardiomyocytes issus de cellules souches pluripotentes343
      • Cultures de modèles complexes344
      • Culture d'explants344
      • Ingénierie tissulaire344
      • Conclusion344
      • Chapitre 23. Culture de cellules endothéliales : applications à l'étude de l'angiogenèse D. Vittet, S. Brouillet, P. Hoffmann, N. Alfaidy, J.-J. Feige347
      • Fonctions et propriétés phsysiologiques et l'endothélium vasculaire347
      • Angiogenèse348
      • Caractérisation des cellules endothéliales348
      • Morphologie348
      • Marqueurs cellulaires349
      • Protocoles de préparations de cultures cellulaires endothéliales (méthodes d'isolement)350
      • Cellules macrovasculaires. Exemple des cellules endothéliales humaines de la veine ombilicale (HUVEC)351
      • Cellules microvasculaires. Exemple des cellules endothéliales humaines placentaire (HPEC)352
      • Préparations commerciales353
      • Intérêt des cultures de cellules endothéliales353
      • Modèles 2D (bidimensionnels) d'angiogenèse353
      • Modèles 3D (tridimensionnels) d'angiogenèse354
      • Perspectives futures des cultures de cellules endothéliales357
      • Chapitre 24. Culture de cellules ostéoblastiques P. Marie, D. Modrowski, O. Fromigué360
      • Origine et différenciation des ostéoblastes360
      • Obtention de cellules ostéoblastiques361
      • Cellules provenant du stroma médullaire361
      • Cellules dérivées de l'os362
      • Autres sources de cellules de types ostéoblastique362
      • Ostéocytes362
      • Lignées cellulaires362
      • Utilisation des cellules ostéoblastiques363
      • Études phénotypiques363
      • Études phénotypiques ex vivo364
      • Applications thérapeutiques des cellules ostéoblastiques366
      • Analyse transcriptomique et protéomique366
      • Thérapie cellulaire et génique366
      • Conclusions et perspectives368
      • Chapitre 25. Système hématopoïétique M. Maynadié, F. Girodon372
      • Hématopoïèse372
      • Localisation de l'hématopoïèse372
      • Cellules de l'hématopoïèse372
      • Microenvironnement ou stroma médullaire374
      • Facteurs régulateurs de l'hématopoïèse375
      • Cultures de cellules hématopoïétiques377
      • Cultures et érythropoïèse377
      • Techniques de cultures377
      • Les différents types de celles cultivables378
      • Exemples d'application des cultures cellulaires378
      • Chapitre 26. Hépatocytes et foie : modèles de référence et nouvelles approches stratégiques M.-A. Robin, C. Guguen-Guillouzo382
      • Cultures primaires d'hépatocytes issus de parenchyme hépatique adulte383
      • Nécessité de déstructurer le tissu par digestion enzymatique : principe et bilan fonctionnel383
      • Cultures primaires en monocouche (2D)384
      • Modulation fonctionnelle par les facteurs environnementaux385
      • Obtention et différenciation d'hépatocytes à partir de cellules souches390
      • Cellules souches d'origine tissulaire adulte390
      • Cellules souches embryonnaires (ESC)390
      • Lignées cellulaires immortalisées et/ou transformées393
      • Lignées d'hépatomes issues de tumeurs393
      • Lignée humaine HepaRG394
      • Lignées d'hépatocytes immortalisées397
      • Innovations technologiques397
      • Développement de microsystèmes ou « puces » à cellules397
      • Cultures tridimensionnelles (3D)398
      • Structuration de bioréacteurs avec fluidique associée398
      • Applications des modèles hépatiques in vitro398
      • Étude des fonctions hépatiques et de leur régulation398
      • Étude du métabolisme et de la toxicité des xénobiotiques399
      • Applications thérapeutiques402
      • Chapitre 27. Système intestinal B. Ducarouge, M. Pelissier-Rota, M. Rolli-Derkinderen, B. Lardeux, M. Lainé, M. Neunlist, M. Jacquier-Sarlin409
      • Généralités sur le système digestif409
      • Principales populations cellulaires de l'épithélium digestif412
      • Cellules souches et organoïdes414
      • Cellules prolifératives des cryptes (cellules non transformées)416
      • Cellules épithéliates intestinales immortalisées418
      • Cellules différenciées dérivées des villosités intestinales (cellules non transformées)419
      • Lignées d'adénocarcinomes : modèles de la différenciation épithéliale420
      • Régulation des fonctions de la barrière épithéliale426
      • Par le mésenchyme et la matrice extracellulaire426
      • Par le système nerveux entérique433
      • Conclusion440
      • Chapitre 28. Cultures de cellules rénales B. L'Azou, J. Cambar448
      • Rappels448
      • Structure et fonctions du rein448
      • Cibles des principaux xénobiotiques451
      • Techniques des cultures cellulaires rénales454
      • Modèles rénaux in vitro complexes454
      • Différents types de cultures de cellules456
      • Cultures de cellules glomérulaires456
      • Cultures de cellules vasculaires corticales rénales461
      • Cultures de cellules tubulaires462
      • Cultures et complexification des modèles467
      • Conclusion469
      • Chapitre 29. Culture de cellules épithéliales respiratoires. V. Prulière-Escabasse, J. Bourbon476
      • Organisation et fonctions des épithéliums du tractus respiratoire chez les mammifères476
      • Description morphologique476
      • Fonctions de l'épithélium mucociliaire des voies de conduction479
      • Fonctions de l'épithélium alvéolaire485
      • Modèles de culture primaire des cellules épithéliales des voies aériennes de conduction487
      • Culture d'explants487
      • Culture de cellules dissociées487
      • Épithélium respiratoire humain reconstitué en xénogreffe489
      • Modèles de culture primaire des cellules épithéliales alvéolaires489
      • Isolement et purification489
      • Maintien des pneumocytes en culture primaire : milieux et supports de culture490
      • Lignées cellulaires épithéliales respiratoires493
      • Lignées exprimant un phénotype cellulaire des voies de conduction494
      • Lignées exprimant un phénotype cellulaire alvéolaire495
      • Dérivation in vitro de cellules épithéliales respiratoires à partir de cellules souches496
      • Applications des cultures de cellules épithéliales respiratoires497
      • Chapitre 30. Culture cellulaire de testicule et d'ovaire pour l'étude de la fonction de reproduction P. Froment, N. Quignot, A. Legendre, V. Rouiller-Fabre, G. Livera, J. Dupont, R. Habert, E. Lemazurier502
      • Fonction de reproduction502
      • Fonction testiculaire502
      • Fonction ovarienne508
      • Développement des gonades512
      • Cultures cellulaires testiculaires516
      • Modèles d'études fondamentales in vitro516
      • Protocoles de culture de cellules testiculaires518
      • Cultures cellulaires ovariennes528
      • Modèles cellulaires528
      • Protocoles de culture de cellules ovariennes529
      • Chapitre 31. Culture primaire de cellules pancréatiques exocrines de souris. Un outil indispensable pour la compréhension de l'étiologie de la carcinogenèse pancréatique U. Valcourt, R. M. Pommier, D. F. Vincent, L. Bartholin544
      • Biologie du pancréas545
      • Culture des cellules acineuses dispersées ou d'acini dispersés548
      • Isolement et culture d'acini dispersés549
      • Considérations générales et précautions549
      • Protocole550
      • Analyse du phénotype des cellules pancréatiques primaires555
      • Extraction des protéines556
      • Extraction des acides ribonucléiques messagers556
      • Analyse du phénotype des cellules557
      • Protocoles complémentaires d'isolement et de culture des cellules acineuses pancréatiques558
      • Concentration en acides aminés558
      • Importance du pH558
      • Méthode de Sphyris et al. (2005)558
      • Méthode de Bläuer et al. (2011) : culture organotypique559
      • Conclusion561
      • Chapitre 32. Culture de cellules de l'oreille interne de mammifère : de la physiopathologie à la thérapie F. François, S. Gaboyard-Niay, J.-L. Puel, F. Venail564
      • Cultures de cellules de cochlée564
      • Culture organotypique d'explant de cochlée565
      • Culture organotypique de tranche de cochlée565
      • Applications des cultures organotypiques de cochlée566
      • Cultures primaires de vestibule567
      • Les différentes techniques568
      • Applications569
      • Conclusion570
      • Chapitre 33. Caractéristiques moléculaires et propriétés fonctionnelles des cellules épithéliales mammaires A. Di-Cicco, M.-A Deugnier572
      • Développement de la glande mammaire572
      • Caractéristiques moléculaires des cellules épithéliales mammaires572
      • Organisation et marqueurs spécifiques de l'épithélium mammaire572
      • Fractionnement des cellules épithéliales mammaires et analyse par cytométrie en flux573
      • Interactions paracrines575
      • Propriétés fonctionnelles des cellules épithéliales mammaires575
      • Potentiel régénératif et clonogénique des cellules basales/myoépithéliales575
      • Activité clonogénique des cellules luminales576
      • Conclusion576
      • Chapitre 34. Système adipocytaire I. Dugail578
      • Fonction des adipocytes578
      • Modèles adipocytaires en culture579
      • Pré-adipocytes de la fraction stroma-vasculaire du tissu adipeux579
      • Lignées adipocytaires580
      • Conditions de culture580
      • Milieux de culture581
      • Exigences en sérum581
      • Repiquages581
      • Induction de la différenciation, contrôles de qualité582
      • Transfert de gènes582
      • Intérêt des cultures d'adipocytes582
      • Partie V
        Autres modèles
      • Chapitre 35. Cultures primaires de cellules cardiaques de bivalves marins G. Dorange, M. Droguet, H. Talarmin587
      • Espèces cibles588
      • Choix du coeur589
      • Anatomie et structure du coeur589
      • Anatomie589
      • Structure589
      • Physiologie592
      • Cultures primaires de cellules cardiaques592
      • Prélèvement du coeur592
      • Isolement des cellules cardiaques594
      • Conditions de culture595
      • Évolution des cultures595
      • Croissance cellulaire597
      • Capacité fonctionnelle des cellules cardiaques en culture599
      • Essais de subculture600
      • Cryopréservation des cellules isolées601
      • Quelques exemples d'application des cultures en toxicologie602
      • Effet de l'acide okadaïque sur les cellules cardiaques de palourde602
      • Effet du tributylétain sur des cardiomyocytes d'huître603
      • Effet du cadmium sur les cardiomyocytes d'huître604
      • Conclusion604
      • Chapitre 36. Cultures primaires de branchies et de muscles de truite arc-en-ciel I. Leguen, J.-C. Gabillard607
      • Conditions de culture cellulaire pour poissons téléostéens607
      • Culture primaire de branchies de truite607
      • Isolement des cellules branchiales608
      • Culture sur support solide609
      • Culture sur support perméable609
      • Culture primaire de cellules satellites de truite611
      • Méthode d'extraction des cellules satellites de truite612
      • Caractérisation des cellules satellites en culture612
      • Chapitre 37. Enjeux fondamentaux et biotechnologiques de la culture des cellules d'arthropodes F. Cousserans, Y. Boublik, F. Salasc, M. Cerutti, T. Dupressoir615
      • Pourquoi cultiver des cellules d'arthropodes ?615
      • Génomique structurale615
      • Génomique fonctionnelle615
      • Modèles animaux616
      • La culture de cellules d'arthropodes existe depuis le début du 20e siècle616
      • Culture de cellules d'arthropodes et agents infectieux616
      • « Montée en puissance » des cultures de cellules d'arthropodes617
      • Spécificités techniques618
      • Production de protéines hétérologues et/ ou recombinantes620
      • Les différents systèmes620
      • « Humanisation » des systèmes de production de protéines recombinantes en cellules d'insecte623
      • Glycosylation dans les cellules d'insecte623
      • « Humanisation » de la voie de biosynthèse des N-glycanes624
      • Perspectives626
      • Production de particules virales627
      • Vaccins627
      • Vecteurs629
      • Conclusion630
      • Partie VI
        Législation
      • Chapitre 38. Aspects éthiques et réglementaires de l'utilisation des cellules, tissus et produits du corps humain : applications aux études in vitro I. Fabre, A. De Guerra639
      • Législation : historique des lois relatives à la bioéthique639
      • Les premières lois de bioéthique639
      • Sanctions en cas d'infractions en matière d'éthique médicale641
      • Organes641
      • Prélèvement à fins scientifiques sur personnes décédées642
      • Tissus, cellules, produits du corps humain et dérivés642
      • Dispositions communes642
      • Prélèvement et collecte642
      • Autorisation des établissements effectuant les prélèvements643
      • Préparation, conservation en utilisation des tissus, des cellules et de leurs dérivés643
      • Recherche sur l'embryon et les cellules souches embryonnaires644
      • Autres modèles cellulaires prospectifs issus d'éléments du corps humain : un cadre législatif moins contraignant644
      • Cellules souches adultes644
      • Cellules souches pluripotentes induites645
      • Textes relatifs à l'importation et à l'exportation d'organes, de tissus et de cellules du corps humain645
      • Pour les organes645
      • Pour les tissus, cellules645
      • Brevetabilité des éléments du corps humain et de ses dérivés646
      • Directive européenne relative à la protection juridique des inventions biotechnologiques646
      • Encadrement juridique communautaire et international dans les différents domaines de la bioéthique646
      • Droit communautaire646
      • Droit international647
      • Conclusion647
      • Postface - Considérations éthiques sur l'usage futur des cultures cellulaires J. Demongeot649
      • Index663

  • Origine de la notice:
    • Electre
  • Disponible - 576.6 CUL

    Niveau 2 - Sciences